Description:

Invenţia se referă la un procedeu de obţinere a unui inhibitor serin-proteazic. Procedeul conform invenţiei constă din aceea că seminţele de pepene verde (Citrullus vulgaris) măcinate şi delipidizate, sunt supuse extracţiei apoase în tampon acetat 0,1M cuH 5 şi precipitare fracţionată a supernatantului cu alcool etilic în două trepte: o primă treaptă în care extractul se tratează timp de 1 h, la temperatura camerei, cu un volum egal de etanol, cu îndepărtarea precipitatului, şi o a doua treaptă în care filtratul din prima treaptă se tratează la -20°C cu 4 volume de etanol, după care precipitatul rezultat se solubilizează în apă distilată şi se aduce într-un volum egal de tampon acetat 0,1M, pH 5,5, se purifică pe o coloană preechilibrată cu tampon acetat, şi se eluează cu soluţie de NaCl în gradient de concentraţie 0...0,6 M în acelaşi tampon, şi fracţiile aduse laH 7,5 cu soluţie 2M de Tris sunt aplicate pe o coloană umplută cu tripsină imobilizată, preechilibrată cu tampon Tris-HCl,H 7,5, după care inhibitorul serin-proteazic se desoarbe prin eluare cu tampon-glicocol-HCl,H 2,8 cu gradient de concentraţie 0...0,3 M în volume egale, rezultând un produs cu o activitate specifică de 9122 UI/mg proteină.